中文网站
ປະຕິກິລິຍາລະບົບຕ່ອງໂສ້ polymerase (PCR) ໄດ້ປະຕິວັດຊີວະວິທະຍາໂມເລກຸນ, ໃຫ້ນັກວິທະຍາສາດສາມາດຂະຫຍາຍລໍາດັບ DNA ສະເພາະດ້ວຍຄວາມແມ່ນຍໍາແລະປະສິດທິພາບທີ່ຫນ້າປະຫລາດໃຈ. ຫົວໃຈຂອງຂະບວນການແມ່ນ PCR ວົງຈອນຄວາມຮ້ອນ, ເປັນເຄື່ອງມືທີ່ສໍາຄັນທີ່ຄວບຄຸມວົງຈອນອຸນຫະພູມທີ່ຈໍາເປັນສໍາລັບການ denaturation DNA, annealing, ແລະການຂະຫຍາຍ. ຢ່າງໃດກໍ່ຕາມ, ປະສິດທິພາບຂອງເຄື່ອງປັ່ນຄວາມຮ້ອນ PCR ແມ່ນຂຶ້ນກັບການປັບຕົວຂອງມັນເອງ. ບົດຄວາມນີ້ສໍາຫຼວດຄວາມສໍາຄັນຂອງການປັບທຽບເຄື່ອງຈັກດ້ວຍຄວາມຮ້ອນ PCR ແລະຜົນກະທົບຂອງຕົນຕໍ່ຜົນການທົດລອງ.
ການສອບທຽບ ກເຄື່ອງວົງຈອນຄວາມຮ້ອນ PCRຮັບປະກັນວ່າອຸປະກອນດໍາເນີນການພາຍໃນຂອບເຂດອຸນຫະພູມທີ່ກໍານົດໄວ້ແລະຮັກສາຄວາມແມ່ນຍໍາທີ່ຕ້ອງການສໍາລັບການຂະຫຍາຍສົບຜົນສໍາເລັດ. ການຄວບຄຸມອຸນຫະພູມແມ່ນສໍາຄັນໃນ PCR ເພາະວ່າແຕ່ລະຂັ້ນຕອນຂອງວົງຈອນແມ່ນອີງໃສ່ເງື່ອນໄຂຄວາມຮ້ອນທີ່ຊັດເຈນ. ຕົວຢ່າງ, ໃນໄລຍະການປ່ຽນເປັນສີ, ສາຍ DNA ຕ້ອງໄດ້ຮັບການໃຫ້ຄວາມຮ້ອນປະມານ 94-98 ອົງສາ C ເພື່ອແຍກພວກມັນ. ຖ້າອຸນຫະພູມຕໍ່າເກີນໄປ, ຄວາມບໍ່ສົມບູນອາດຈະເກີດຂື້ນ, ເຮັດໃຫ້ການຂະຫຍາຍບໍ່ມີປະສິດທິພາບ. ໃນທາງກົງກັນຂ້າມ, ຖ້າອຸນຫະພູມສູງເກີນໄປ, ມັນອາດຈະທໍາລາຍ DNA ຫຼື enzymes ທີ່ໃຊ້ໃນປະຕິກິລິຍາ.
ນອກຈາກນັ້ນ, ຂັ້ນຕອນ annealing ຮຽກຮ້ອງໃຫ້ມີອຸນຫະພູມສະເພາະ, ເຊິ່ງມັກຈະຖືກກໍານົດໂດຍອຸນຫະພູມ melting ຂອງ primers ທີ່ໃຊ້. ຖ້າເຄື່ອງວັດແທກຄວາມຮ້ອນບໍ່ຖືກປັບໃຫ້ຖືກຕ້ອງ, ອຸນຫະພູມການຫມູນວຽນອາດຈະຖືກປິດ, ເຮັດໃຫ້ເກີດການຜູກມັດທີ່ບໍ່ສະເພາະ ຫຼືຂາດການຜູກມັດຢ່າງສົມບູນ. ນີ້ສາມາດສົ່ງຜົນໃຫ້ຜົນຜະລິດຕ່ໍາຫຼືການຂະຫຍາຍຜະລິດຕະພັນທີ່ບໍ່ໄດ້ຕັ້ງໃຈ, ໃນທີ່ສຸດກໍ່ທໍາລາຍຄວາມສົມບູນຂອງການທົດລອງ.
ການປັບຕົວແບບປົກກະຕິຂອງເຄື່ອງປັ່ນຄວາມຮ້ອນ PCR ເປັນສິ່ງຈໍາເປັນເພື່ອຮັກສາຜົນໄດ້ຮັບທີ່ເຊື່ອຖືໄດ້ແລະສາມາດແຜ່ພັນໄດ້. ເມື່ອເວລາຜ່ານໄປ, ເຄື່ອງສູບຄວາມຮ້ອນສາມາດລອຍຈາກການຕັ້ງຄ່າການປັບຕົວຂອງເຂົາເຈົ້າເນື່ອງຈາກປັດໃຈຕ່າງໆເຊັ່ນ: ການສວມໃສ່ແລະນໍ້າຕາ, ການປ່ຽນແປງຂອງສິ່ງແວດລ້ອມ, ແລະແມ້ກະທັ້ງການເຫນັງຕີງຂອງພະລັງງານ. ການກວດສອບການປັບຕົວແບບປົກກະຕິສາມາດຊ່ວຍລະບຸຄວາມແຕກຕ່າງເຫຼົ່ານີ້ ແລະຮັບປະກັນວ່າເຄື່ອງມືເຮັດວຽກໄດ້ດີທີ່ສຸດ. ນີ້ເປັນສິ່ງສໍາຄັນໂດຍສະເພາະໃນສະພາບແວດລ້ອມການຄົ້ນຄວ້າທີ່ການວັດແທກທີ່ຊັດເຈນແມ່ນສໍາຄັນ, ເຊັ່ນ: ໃນການວິນິດໄສທາງດ້ານການຊ່ວຍ, ການຄົ້ນຄວ້າພັນທຸກໍາ, ແລະການວິເຄາະ forensic.
ນອກເຫນືອຈາກການຮັບປະກັນການຄວບຄຸມອຸນຫະພູມທີ່ຊັດເຈນ, ການປັບທຽບແມ່ນມີບົດບາດສໍາຄັນໃນການປະຕິບັດໂດຍລວມຂອງວົງຈອນຄວາມຮ້ອນ PCR. ເຄື່ອງທີ່ປັບຕົວເຂົ້າກັນໄດ້ດີສາມາດເພີ່ມປະສິດທິພາບຂອງຂະບວນການ PCR, ດັ່ງນັ້ນການເພີ່ມຜົນຜະລິດຂອງ DNA ເປົ້າຫມາຍ. ນີ້ເປັນສິ່ງສໍາຄັນໂດຍສະເພາະໃນຄໍາຮ້ອງສະຫມັກທີ່ມີອຸປະກອນການເລີ່ມຕົ້ນຈໍາກັດ, ເຊັ່ນ: ການວິເຄາະຈຸລັງດຽວຫຼືການຄົ້ນຄວ້າ DNA ວັດຖຸບູຮານ. ໂດຍການເພີ່ມປະສິດທິພາບສູງສຸດຂອງຂະບວນການຂະຫຍາຍ, ນັກຄົ້ນຄວ້າສາມາດໄດ້ຮັບປະລິມານທີ່ພຽງພໍຂອງ DNA ສໍາລັບຄໍາຮ້ອງສະຫມັກລຸ່ມ, ເຊັ່ນ: ການຈັດລໍາດັບຫຼື cloning.
ຍິ່ງໄປກວ່ານັ້ນ, ຄວາມສໍາຄັນຂອງການປັບທຽບໄດ້ຂະຫຍາຍອອກໄປນອກເຫນືອການທົດລອງດຽວ. ໃນສະພາບແວດລ້ອມທີ່ມີການຄວບຄຸມ, ເຊັ່ນ: ຫ້ອງທົດລອງທາງດ້ານການຊ່ວຍ, ມາດຕະການຄວບຄຸມຄຸນນະພາບຢ່າງເຂັ້ມງວດຕ້ອງໄດ້ຮັບການປະຕິບັດຕາມ. ການປັບຕົວແບບປົກກະຕິຂອງເຄື່ອງສູບຄວາມຮ້ອນ PCR ມັກຈະເປັນຄວາມຕ້ອງການສໍາລັບການປະຕິບັດຕາມມາດຕະຖານກົດລະບຽບ. ການຂາດການຮັກສາການປັບຕົວທີ່ເຫມາະສົມສາມາດນໍາໄປສູ່ຜົນໄດ້ຮັບທີ່ບໍ່ຖືກຕ້ອງ, ເຊິ່ງສາມາດມີຜົນກະທົບທີ່ຮ້າຍແຮງຕໍ່ການຕັດສິນໃຈໃນການດູແລແລະການປິ່ນປົວຂອງຄົນເຈັບ.
ສະຫລຸບລວມແລ້ວ, calibration ຂອງເຄື່ອງວົງຈອນຄວາມຮ້ອນ PCRເປັນລັກສະນະພື້ນຖານຂອງຊີວະວິທະຍາໂມເລກຸນທີ່ບໍ່ສາມາດມອງຂ້າມໄດ້. ການຄວບຄຸມອຸນຫະພູມທີ່ຖືກຕ້ອງແມ່ນສໍາຄັນຕໍ່ຄວາມສໍາເລັດຂອງ PCR, ແລະການປັບຕົວແບບປົກກະຕິໃຫ້ແນ່ໃຈວ່າເຄື່ອງວົງຈອນຄວາມຮ້ອນກໍາລັງເຮັດວຽກຢູ່ໃນຂໍ້ກໍານົດທີ່ກໍານົດໄວ້. ໂດຍການເຮັດໃຫ້ການປັບທຽບເປັນບູລິມະສິດ, ນັກຄົ້ນຄວ້າສາມາດປັບປຸງຄວາມຫນ້າເຊື່ອຖືແລະການແຜ່ພັນຂອງຜົນໄດ້ຮັບ, ໃນທີ່ສຸດຄວາມກ້າວຫນ້າທາງດ້ານຊີວະວິທະຍາໂມເລກຸນແລະການນໍາໃຊ້ຂອງມັນໃນຢາປົວພະຍາດ, ພັນທຸກໍາ, ແລະອື່ນໆ. ໃນຂະນະທີ່ຄວາມຕ້ອງການຂອງເຕັກນິກໂມເລກຸນທີ່ຊັດເຈນແລະຖືກຕ້ອງຍັງສືບຕໍ່ເຕີບໂຕ, ຄວາມສໍາຄັນຂອງການຮັກສາເຄື່ອງຈັກຄວາມຮ້ອນ PCR ທີ່ໄດ້ຮັບການປັບຕົວດີກໍ່ຈະກາຍເປັນທີ່ໂດດເດັ່ນ.
ເວລາປະກາດ: 20-03-2025
ການຕັ້ງຄ່າຄວາມເປັນສ່ວນຕົວ