ຄວາມສໍາຄັນຂອງການ Calibration ສໍາລັບປະສິດທິພາບເຄື່ອງສູບຄວາມຮ້ອນ

ລົດຖີບຄວາມຮ້ອນແມ່ນເຄື່ອງມືທີ່ຂາດບໍ່ໄດ້ໃນຂົງເຂດຊີວະວິທະຍາໂມເລກຸນ ແລະການຄົ້ນຄວ້າພັນທຸກໍາ. ໂດຍທົ່ວໄປເອີ້ນວ່າເຄື່ອງ PCR (ຕິກິຣິຍາຕ່ອງໂສ້ polymerase), ອຸປະກອນນີ້ເປັນສິ່ງຈໍາເປັນສໍາລັບການຂະຫຍາຍລໍາດັບ DNA, ໃຫ້ນັກວິທະຍາສາດເຮັດການທົດລອງທີ່ຫຼາກຫຼາຍຈາກການໂຄນໄປຫາການວິເຄາະການສະແດງອອກຂອງ gene. ຢ່າງໃດກໍ່ຕາມ, ການປະຕິບັດຂອງເຄື່ອງປັ່ນຄວາມຮ້ອນແມ່ນຂຶ້ນກັບການປັບຕົວຂອງມັນຢ່າງຫຼວງຫຼາຍ, ດັ່ງນັ້ນນັກຄົ້ນຄວ້າຕ້ອງເຂົ້າໃຈຄວາມສໍາຄັນຂອງຂະບວນການນີ້.

Calibration ແມ່ນຂະບວນການປັບແລະກວດສອບຄວາມຖືກຕ້ອງຂອງການວັດແທກອຸປະກອນຕໍ່ກັບມາດຕະຖານທີ່ຮູ້ຈັກ. ສໍາລັບເຄື່ອງປັ່ນຄວາມຮ້ອນ, ນີ້ກ່ຽວຂ້ອງກັບການຮັບປະກັນວ່າການຕັ້ງຄ່າອຸນຫະພູມແມ່ນຊັດເຈນ ແລະສອດຄ່ອງຕະຫຼອດຂະບວນການຂີ່ຈັກຍານ. ຄວາມຖືກຕ້ອງຂອງການຄວບຄຸມອຸນຫະພູມແມ່ນສໍາຄັນ, ເຖິງແມ່ນວ່າການບິດເບືອນຂະຫນາດນ້ອຍສາມາດນໍາໄປສູ່ຄວາມແຕກຕ່າງທີ່ສໍາຄັນໃນຜົນຂອງການທົດລອງ PCR. ສໍາລັບຕົວຢ່າງ, ຖ້າອຸນຫະພູມບໍ່ເຖິງ, ສາຍ DNA ອາດຈະບໍ່ແຍກອອກຢ່າງຖືກຕ້ອງ, ເຮັດໃຫ້ການຂະຫຍາຍບໍ່ມີປະສິດທິພາບ. ເຊັ່ນດຽວກັນ, ຖ້າຫາກວ່າອຸນຫະພູມ annealing ຕ່ໍາເກີນໄປຫຼືສູງເກີນໄປ, ມັນສາມາດນໍາໄປສູ່ການຜູກມັດ nonspecific ຫຼືຂາດການຜູກມັດຢ່າງສົມບູນ, ໃນທີ່ສຸດ compromising ຄວາມສົມບູນຂອງການທົດລອງ.

ຫນຶ່ງໃນເຫດຜົນຕົ້ນຕໍວ່າເປັນຫຍັງການປັບທຽບແມ່ນສໍາຄັນສໍາລັບ cyclers ຄວາມຮ້ອນແມ່ນຜົນກະທົບທີ່ມັນມີຢູ່ໃນການສືບພັນ. ໃນການຄົ້ນຄວ້າວິທະຍາສາດ, ການສືບພັນແມ່ນພື້ນຖານຂອງຄວາມຫນ້າເຊື່ອຖື. ຖ້າເຄື່ອງວັດແທກຄວາມຮ້ອນບໍ່ໄດ້ຖືກປັບຢ່າງຖືກຕ້ອງ, ຜົນໄດ້ຮັບຈາກການທົດລອງທີ່ແຕກຕ່າງກັນອາດຈະແຕກຕ່າງກັນ, ເຮັດໃຫ້ມັນຍາກທີ່ຈະເຮັດຊ້ໍາຜົນການຄົ້ນຄວ້າ. ຄວາມບໍ່ສອດຄ່ອງນີ້ສາມາດນໍາໄປສູ່ການສະຫຼຸບທີ່ຜິດພາດແລະການສູນເສຍຊັບພະຍາກອນ, ທໍາລາຍຄວາມຖືກຕ້ອງລວມຂອງການຄົ້ນຄວ້າ. ການ​ປັບ​ທຽບ​ເປັນ​ປົກ​ກະ​ຕິ​ເຮັດ​ໃຫ້​ແນ່​ໃຈວ່​າ cycler ຄວາມ​ຮ້ອນ​ແມ່ນ​ປະ​ຕິ​ບັດ​ຢູ່​ພາຍ​ໃນ​ຕົວ​ກໍາ​ນົດ​ການ​ທີ່​ກໍາ​ນົດ​ໄວ້​, ເຮັດ​ໃຫ້​ການ​ເພີ່ມ​ຄວາມ​ຫນ້າ​ເຊື່ອ​ຖື​ຂອງ​ຜົນ​ໄດ້​ຮັບ​ຂອງ​ທ່ານ​.

ຍິ່ງໄປກວ່ານັ້ນ, ຄວາມສໍາຄັນຂອງການປັບທຽບບໍ່ພຽງແຕ່ຢູ່ໃນຄວາມຖືກຕ້ອງຂອງການຕັ້ງຄ່າອຸນຫະພູມ, ແຕ່ຍັງຢູ່ໃນຄວາມເປັນເອກະພາບຂອງການແຜ່ກະຈາຍຂອງອຸນຫະພູມພາຍໃນ cycler ຄວາມຮ້ອນ. ເຄື່ອງ​ມື​ທີ່​ປັບ​ທຽບ​ໄດ້​ດີ​ຄວນ​ຈະ​ສາ​ມາດ​ສະ​ຫນອງ​ອຸນ​ຫະ​ພູມ​ທີ່​ສອດ​ຄ້ອງ​ກັນ​ກັບ​ການ​ທັງ​ຫມົດ​ໃນ​ແຜ່ນ multiwell ໄດ້​. ການປ່ຽນແປງຂອງອຸນຫະພູມສາມາດນໍາໄປສູ່ຄວາມແຕກຕ່າງຂອງອັດຕາການຂະຫຍາຍ, ເຊິ່ງສາມາດສົ່ງຜົນກະທົບຕໍ່ຜົນໄດ້ຮັບແລະໃນທີ່ສຸດຜົນໄດ້ຮັບໂດຍລວມຂອງການທົດລອງ. ໂດຍການປັບຕົວວົງຈອນຄວາມຮ້ອນ, ນັກຄົ້ນຄວ້າສາມາດຮັບປະກັນວ່າຕົວຢ່າງທັງຫມົດແມ່ນຢູ່ພາຍໃຕ້ສະພາບຄວາມຮ້ອນດຽວກັນ, ດັ່ງນັ້ນການປັບປຸງຄຸນນະພາບຂໍ້ມູນ.

ນອກເຫນືອຈາກການປັບປຸງຄວາມຖືກຕ້ອງແລະການເຮັດຊ້ໍາອີກ, ການປັບຕົວເຄື່ອງວົງຈອນຄວາມຮ້ອນຂອງທ່ານສາມາດຍືດອາຍຸຂອງອຸປະກອນໄດ້. ເມື່ອເວລາຜ່ານໄປ, ອົງປະກອບພາຍໃນເຄື່ອງປັ່ນຄວາມຮ້ອນສາມາດສວມໃສ່ຫຼືມີປະສິດທິພາບຫນ້ອຍລົງ, ເຊິ່ງນໍາໄປສູ່ຄວາມຜິດພາດທີ່ອາດຈະເກີດຂື້ນ. ໂດຍການປັບອຸປະກອນຢ່າງເປັນປົກກະຕິ, ນັກຄົ້ນຄວ້າສາມາດກໍານົດແລະແກ້ໄຂບັນຫາກ່ອນທີ່ມັນຈະເປັນບັນຫາທີ່ຮ້າຍແຮງ, ຮັບປະກັນວ່າວົງຈອນຄວາມຮ້ອນຍັງຄົງຢູ່ໃນຄໍາສັ່ງທີ່ດີທີ່ສຸດ. ວິທີການຕັ້ງໃຈໃນການປັບທຽບດັ່ງກ່າວບໍ່ພຽງແຕ່ຈະຊ່ວຍປະຢັດຄ່າໃຊ້ຈ່າຍທີ່ກ່ຽວຂ້ອງກັບການສ້ອມແປງຫຼືການທົດແທນ, ແຕ່ຍັງຫຼຸດຜ່ອນການ downtime ໃນຫ້ອງທົດລອງ.

ສະຫລຸບລວມແລ້ວ, calibration ຂອງລົດຖີບຄວາມຮ້ອນເປັນລັກສະນະພື້ນຖານຂອງການຮັບປະກັນການປະຕິບັດແລະຄວາມຫນ້າເຊື່ອຖືຂອງພວກເຂົາໃນການຄົ້ນຄວ້າວິທະຍາສາດ. ການຄວບຄຸມອຸນຫະພູມທີ່ຊັດເຈນແລະຄວາມເປັນເອກະພາບແມ່ນສໍາຄັນຕໍ່ຄວາມສໍາເລັດຂອງ PCR ແລະການທົດລອງທີ່ຂຶ້ນກັບອຸນຫະພູມອື່ນໆ. ໂດຍການເຮັດໃຫ້ການປັບທຽບເປັນປົກກະຕິເປັນບູລິມະສິດ, ນັກຄົ້ນຄວ້າສາມາດປັບປຸງການສືບພັນຂອງຜົນໄດ້ຮັບ, ຮັກສາຄວາມສົມບູນຂອງຜົນການຄົ້ນພົບ, ແລະຍືດອາຍຸຂອງອຸປະກອນຂອງເຂົາເຈົ້າ. ໃນຂະນະທີ່ຂະແຫນງຊີວະວິທະຍາໂມເລກຸນສືບຕໍ່ກ້າວຫນ້າ, ຄວາມສໍາຄັນຂອງການປັບຕົວເຄື່ອງວົງຈອນຄວາມຮ້ອນຈະສືບຕໍ່ເປັນປັດໃຈສໍາຄັນໃນການຂັບລົດຄວາມກ້າວຫນ້າທາງດ້ານວິທະຍາສາດແລະນະວັດກໍາ.