ສຳຫຼວດຄວາມຄ່ອງຕົວຂອງເຄື່ອງຈັກລະບາຍຄວາມຮ້ອນໃນການຄົ້ນຄວ້າ

ເຄື່ອງສູບຄວາມຮ້ອນ, ເຊິ່ງເອີ້ນກັນວ່າເຄື່ອງ PCR, ແມ່ນເຄື່ອງມືທີ່ສໍາຄັນໃນຊີວະວິທະຍາໂມເລກຸນແລະການຄົ້ນຄວ້າພັນທຸກໍາ. ເຄື່ອງມືເຫຼົ່ານີ້ໄດ້ຖືກນໍາໃຊ້ເພື່ອຂະຫຍາຍ DNA ແລະ RNA ໂດຍຜ່ານເທກໂນໂລຍີລະບົບຕ່ອງໂສ້ປະຕິກິລິຢາ polymerase (PCR). ແນວໃດກໍ່ຕາມ, ຄວາມຄ່ອງຕົວຂອງເຄື່ອງປັ່ນຄວາມຮ້ອນບໍ່ຈໍາກັດພຽງແຕ່ຄໍາຮ້ອງສະຫມັກ PCR. ໃນບົດຄວາມນີ້, ພວກເຮົາຈະສໍາຫຼວດວິທີການຕ່າງໆທີ່ໃຊ້ cyclers ຄວາມຮ້ອນໃນການຄົ້ນຄວ້າແລະຄວາມສໍາຄັນຂອງພວກເຂົາໃນການກ້າວຫນ້າທາງດ້ານຄວາມຮູ້ທາງວິທະຍາສາດ.

1. ການຂະຫຍາຍ PCR

ໜ້າທີ່ຫຼັກຂອງ ກລົດຖີບຄວາມຮ້ອນແມ່ນເພື່ອປະຕິບັດການຂະຫຍາຍ PCR, ເຊິ່ງເປັນສິ່ງສໍາຄັນສໍາລັບການນໍາໃຊ້ຊີວະວິທະຍາໂມເລກຸນທີ່ຫລາກຫລາຍ. ໂດຍການເອົາຕົວຢ່າງ DNA ຫຼື RNA ໄປສູ່ການປ່ຽນແປງຂອງອຸນຫະພູມ, ເຄື່ອງວົງຈອນຄວາມຮ້ອນສົ່ງເສີມການ denaturation, annealing, ແລະການຂະຫຍາຍສາຍພັນອາຊິດນິວຄລີອິກ, ເຊິ່ງກໍ່ໃຫ້ເກີດການຂະຫຍາຍຕົວເລກຂອງລໍາດັບເປົ້າຫມາຍສະເພາະ. ຂະບວນການນີ້ແມ່ນສໍາຄັນສໍາລັບການວິເຄາະທາງພັນທຸກໍາ, ການສຶກສາການສະແດງອອກຂອງເຊື້ອແບັກທີເຣັຍ, ແລະການກວດຫາຕົວແທນຕິດເຊື້ອ.

2. PCR ປະລິມານ (qPCR)

ນອກເຫນືອໄປຈາກ PCR ມາດຕະຖານ, ເຄື່ອງປັ່ນຄວາມຮ້ອນໄດ້ຖືກນໍາໃຊ້ສໍາລັບ PCR ປະລິມານຫຼື qPCR, ໃຫ້ປະລິມານຂອງເປົ້າຫມາຍອາຊິດນິວຄລີອິກໃນຕົວຢ່າງ. ໂດຍການລວມເອົາສີຍ້ອມ fluorescent ຫຼື probes, ເຄື່ອງວົງຈອນຄວາມຮ້ອນສາມາດວັດແທກການສະສົມຂອງຜະລິດຕະພັນ PCR ໃນເວລາທີ່ແທ້ຈິງ, ສະຫນອງຄວາມເຂົ້າໃຈທີ່ມີຄຸນຄ່າກ່ຽວກັບລະດັບການສະແດງອອກຂອງເຊື້ອສາຍ, ການໂຫຼດໄວຣັສ, ແລະການປ່ຽນແປງທາງພັນທຸກໍາ.

3. Reverse transcription PCR (RT-PCR)

ເຄື່ອງສູບຄວາມຮ້ອນມີບົດບາດສໍາຄັນໃນ PCR transcription reverse, ເຕັກນິກທີ່ແປງ RNA ເຂົ້າໄປໃນ DNA ເສີມ (cDNA) ສໍາລັບການຂະຫຍາຍຕໍ່ມາ. ວິທີການນີ້ແມ່ນສໍາຄັນສໍາລັບການສຶກສາການສະແດງອອກຂອງເຊື້ອ, ໄວຣັສ RNA, ແລະຮູບແບບການແຍກ mRNA. ເຄື່ອງຈັກລະບາຍຄວາມຮ້ອນທີ່ມີການຄວບຄຸມອຸນຫະພູມທີ່ຊັດເຈນແມ່ນສໍາຄັນຕໍ່ກັບຄວາມສໍາເລັດຂອງການທົດລອງ RT-PCR.

4. ດິຈິຕອລ PCR

ຄວາມກ້າວຫນ້າຂອງເທກໂນໂລຍີ cycler ຄວາມຮ້ອນໄດ້ເຮັດໃຫ້ການພັດທະນາຂອງ PCR ດິຈິຕອນ, ເປັນວິທີການທີ່ມີຄວາມອ່ອນໄຫວສູງສໍາລັບການກໍານົດປະລິມານຢ່າງແທ້ຈິງຂອງອາຊິດ nucleic. ໂດຍການແບ່ງຕິກິຣິຍາ PCR ເຂົ້າໄປໃນ microreactions ຫຼາຍພັນຄົນ, ເຄື່ອງປັ່ນຄວາມຮ້ອນສາມາດກໍານົດຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນເບື້ອງຕົ້ນຂອງໂມເລກຸນເປົ້າຫມາຍໄດ້ຢ່າງຖືກຕ້ອງ, ເຮັດໃຫ້ PCR ດິຈິຕອນເປັນເຄື່ອງມືທີ່ມີຄຸນຄ່າສໍາລັບການກວດພົບການກາຍພັນທີ່ຫາຍາກແລະການວິເຄາະການປ່ຽນແປງຕົວເລກ.

5. ການ​ກະ​ກຽມ​ຫ້ອງ​ສະ​ຫມຸດ​ລໍາ​ດັບ​ຕໍ່​ໄປ​

ເຄື່ອງຈັກລະບາຍຄວາມຮ້ອນແມ່ນສ່ວນໜຶ່ງທີ່ສຳຄັນຂອງຂະບວນການກະກຽມຫ້ອງສະໝຸດສຳລັບແອັບພລິເຄຊັ່ນການຈັດລຳດັບລຸ້ນຕໍ່ໄປ (NGS). ໂດຍການປະຕິບັດການຂະຫຍາຍຊິ້ນສ່ວນ DNA ໂດຍອີງໃສ່ PCR, ເຄື່ອງວົງຈອນຄວາມຮ້ອນເຮັດໃຫ້ການກໍ່ສ້າງຫ້ອງສະຫມຸດຈັດລໍາດັບຈາກອຸປະກອນການເລີ່ມຕົ້ນທີ່ຈໍາກັດ, ໃຫ້ນັກຄົ້ນຄວ້າວິເຄາະ genome, transcriptome, ຫຼື epigenome ທັງຫມົດຂອງອົງການຈັດຕັ້ງ.

6. ວິສະວະກໍາທາດໂປຼຕີນແລະ Mutagenesis

ນອກເຫນືອໄປຈາກການຂະຫຍາຍອາຊິດນິວຄລີອິກ, ເຄື່ອງວົງຈອນຄວາມຮ້ອນໄດ້ຖືກນໍາໃຊ້ໃນວິສະວະກໍາທາດໂປຼຕີນແລະການສຶກສາ mutagenesis. ການ mutagenesis ໂດຍກົງຈາກສະຖານທີ່, ການເພີ່ມປະສິດທິພາບການສະແດງອອກຂອງທາດໂປຼຕີນ, ແລະການທົດລອງວິວັດທະນາການຊີ້ນໍາມັກຈະອີງໃສ່ເຕັກນິກ PCR, ແລະເຄື່ອງວົງຈອນຄວາມຮ້ອນທີ່ມີການຄວບຄຸມອຸນຫະພູມທີ່ຊັດເຈນແລະອັດຕາຄວາມຮ້ອນແລະຄວາມເຢັນທີ່ເປັນເອກະພາບແມ່ນສໍາຄັນຕໍ່ການໄດ້ຮັບຜົນໄດ້ຮັບທີ່ຖືກຕ້ອງແລະສາມາດແຜ່ພັນໄດ້.

7. ການທົດສອບຄວາມປອດໄພດ້ານສິ່ງແວດລ້ອມ ແລະອາຫານ

ເຄື່ອງສູບຄວາມຮ້ອນຍັງຖືກນໍາໃຊ້ໃນການທົດສອບຄວາມປອດໄພດ້ານສິ່ງແວດລ້ອມແລະອາຫານ, ໂດຍສະເພາະການກວດພົບເຊື້ອພະຍາດຈຸລິນຊີ, ສິ່ງມີຊີວິດທີ່ດັດແປງພັນທຸກໍາ (GMOs) ແລະເຊື້ອພະຍາດທີ່ເກີດຈາກອາຫານ. ການທົດສອບທີ່ອີງໃສ່ PCR ດໍາເນີນການກ່ຽວກັບເຄື່ອງປັ່ນຄວາມຮ້ອນເຮັດໃຫ້ການກໍານົດຕົວຢ່າງໄວແລະສະເພາະຂອງສິ່ງປົນເປື້ອນ, ຮັບປະກັນຄວາມປອດໄພແລະຄຸນນະພາບຂອງຕົວຢ່າງອາຫານແລະສິ່ງແວດລ້ອມ.

ສະຫຼຸບ,ລົດຖີບຄວາມຮ້ອນແມ່ນເຄື່ອງມືທີ່ຂາດບໍ່ໄດ້ໃນຊີວະວິທະຍາໂມເລກຸນ ແລະການຄົ້ນຄວ້າພັນທຸກໍາ, ສະຫນອງຄໍາຮ້ອງສະຫມັກທີ່ຫຼາກຫຼາຍນອກເຫນືອຈາກການຂະຫຍາຍ PCR ແບບດັ້ງເດີມ. ຄວາມຄ່ອງແຄ້ວແລະຄວາມແມ່ນຍໍາຂອງພວກມັນເຮັດໃຫ້ພວກມັນມີຄວາມສໍາຄັນສໍາລັບການທົດລອງຕັ້ງແຕ່ການວິເຄາະການສະແດງອອກຂອງເຊື້ອພັນຈົນເຖິງການຕິດຕາມສິ່ງແວດລ້ອມ. ໃນຂະນະທີ່ເຕັກໂນໂລຢີສືບຕໍ່ກ້າວຫນ້າ, ເຄື່ອງປັ່ນລົດຖີບຄວາມຮ້ອນມີແນວໂນ້ມທີ່ຈະມີບົດບາດສໍາຄັນຫຼາຍຂຶ້ນໃນການຂັບລົດການຄົ້ນພົບແລະນະວັດຕະກໍາທາງວິທະຍາສາດ.